एसडीएस पृष्ठ और पश्चिमी ब्लाट के बीच अंतर | एसडीएस पृष्ठ बनाम वेस्टर्न ब्लॉट

मुख्य अंतर - एसडीएस पृष्ठ बनाम वेस्टर्न ब्लॉट

पश्चिमी ब्लॉटिंग एक तकनीक है जो प्रोटीन नमूने से विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाता है। इस तकनीक को कई महत्वपूर्ण चरणों के माध्यम से किया जाता है: जेल वैद्युतकणसंचलन, धुंधलापन और संकरण। सोडियम डोडेक्लिक सल्फेट पॉलीएक्लाइमाइड जेल वैद्युतकणसंचलन (एसडीएस पृष्ठ) एक तरह की जेल वैद्युतकणसंचिकित्सा तकनीक है जो कि उनके आकार (आणविक भार) के अनुसार प्रोटीन को अलग करने के लिए प्रयोग किया जाता है। पश्चिमी धब्बा एक धुंधला झिल्ली का एक विशेष पत्रक है जिसका इस्तेमाल एसडीएस पेज में प्रोटीन के समान पैटर्न को हस्तांतरित करने के लिए किया जाता है। एसडीएस पृष्ठ और पश्चिमी धब्बा के बीच मुख्य अंतर यह है कि एसडीएस पृष्ठ एक मिश्रण जबकि पश्चिमी धब्बा एक मिश्रण से विशिष्ट प्रोटीन की पहचान और मात्रा का ठहराव की अनुमति देता है में प्रोटीन के पृथक्करण की अनुमति देता है। दोनों प्रोटीन विश्लेषण अध्ययनों में उपयोगी होते हैं।

सामग्री

1। अवलोकन और महत्वपूर्ण अंतर

2 एसडीएस पेज क्या है

3 पश्चिमी ब्लॉट

4 क्या है साइड तुलना द्वारा साइड - एसडीएस पृष्ठ बनाम वेस्टर्न ब्लॉट

5 सारांश

एसडीएस पेज क्या है?

एसडीएस पृष्ठ एक जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक है जो प्रोटीन जुदाई के लिए प्रयोग किया जाता है। यह सामान्यतः जैव रसायन, आनुवंशिकी, फोरेंसिक और आणविक जीव विज्ञान में प्रयोग किया जाता है। प्रोटीन नमूने से निकाले जाने के बाद, वे एसडीएस और पॉलीएक्लाइमाइड से बना एक जेल पर चलाए जाते हैं। एसडीएस एक एनोनिक डिटर्जेंट है जो प्रोटीन (विकृत प्रोटीन) को लाइनरीज करने के लिए और उनके आणविक द्रव्यमान के आनुपातिक लाइनरीकृत प्रोटीन के लिए एक नकारात्मक चार्ज प्रदान करने के लिए उपयोग किया जाता है। जेल के लिए पॉलीसिरीमाइड ठोस समर्थन बन जाता है डेनेक्टर्ड प्रोटीन, जो नकारात्मक रूप से जेल के माध्यम से तंत्र के सकारात्मक अंत की ओर पलायन करते हैं। प्रोटीन के आकार के अनुसार, माइग्रेट करने वाली गति प्रोटीन के बीच भिन्न होती है और जुदाई होती है। इसलिए, एसडीएस पृष्ठ उनके आकारों के आधार पर अलग-अलग प्रोटीनों के अलग होने के लिए उपयोगी है।

प्रोटीन के विभाजन के लिए पॉलीएक्लाइमाइड जेल की तैयारी एसडीएस पेज में एक महत्वपूर्ण कदम है। Polyacrylamide और क्रॉस-लिंकिंग एजेंट के प्रकार का सही एकाग्रता ने जेल के भौतिक गुणों को मजबूती से प्रभावित किया, जो अलग-अलग प्रोटीन के वास्तविक विभाजन को बनाता है। प्रभावी जुदाई के लिए जेल का ताकना आकार ठीक से प्रबंधित किया जाना चाहिए। हालांकि, एसडीएस पृष्ठ को उच्च-रिज़ॉल्यूशन प्रोटीन अलगाव तकनीक के रूप में माना जाता है।

एसडीएस पृष्ठ तकनीक प्रोटीन विश्लेषण में एक बड़ी सीमा है। चूंकि एसडीएस अलग होने से पूर्व प्रोटीन निषेध करता है, इसलिए यह एंजाइमेटिक गतिविधि, प्रोटीन बाइंडिंग इंटरैक्शन, प्रोटीन कॉफ़ैक्टर्स आदि की पहचान करने की अनुमति नहीं देता है।

चित्रा 01: एसडीएस पृष्ठ

पश्चिमी ब्लाट क्या है?

पश्चिमी ब्लोटिंग तकनीक प्रोटीन मिश्रण से एक विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने और प्रोटीन की मात्रा और आणविक वजन के माप को सक्षम करता है। पश्चिमी धब्बा एसडीएस-पॉलीएक्लीमाइड जेल में प्रोटीन पैटर्न की आईने की छवि पाने के लिए ब्लूटिंग प्रक्रिया के दौरान इस्तेमाल किया जाने वाला झिल्ली है। पश्चिमी झिल्ली के लिए प्रयोग किया जाता है जो झिल्ली ज्यादातर nitrocellulose या polyvinylidene difluoride (पीवीडीएफ) से बना है। ट्रांसफ़र्ड प्रोटीन के साथ झिल्ली का इस्तेमाल वांछित प्रोटीन की पहचान करने के लिए किया जा सकता है। हाइब्रिडिजेशन द्वारा वांछित प्रोटीन का पता लगाने के लिए उच्च गुणवत्ता वाले एंटीबॉडी की आवश्यकता होती है। एंटीबॉडी अपने विशिष्ट एंटीजन के साथ बांधता है और वांछित एंटीजन की उपस्थिति का पता चलता है जो प्रोटीन है

एसडीएस पॉलीसिलामाइड जेल से पश्चिमी धब्बों में प्रोटीन का स्थानांतरण इलेक्ट्रोब्लोटिंग द्वारा किया जाता है। यह एक प्रभावी और तेज़ तरीका है जो प्रोटीन को जेल से बाहर निकालना और नाइट्रोकेलुलोज़ झिल्ली (पश्चिमी ब्लॉट) पर पारित करने का कारण बनता है।

चित्रा 02: पश्चिमी ब्लाट

एसडीएस पृष्ठ और पश्चिमी ब्लाट में क्या अंतर है?

- तालिका से पहले अंतर आलेख ->

एसडीएस पृष्ठ बनाम पश्चिमी ब्लाट
एसडीएस पृष्ठ एक जेल वैद्युतकणसंचलन तकनीक है	पश्चिमी धब्बा एक तकनीक है जो मिश्रण से एक विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने के लिए एक झिल्ली पर किया जाता है
उपयोग करें
एसडीएस पृष्ठ उनके आकारों के अनुसार प्रोटीनों को अलग करने की अनुमति देता है।	पश्चिमी धब्बा एसडीएस पृष्ठ जेल पर अपने पैटर्न को बदलने के बिना प्रोटीन के हस्तांतरण की अनुमति देता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ संकरण की अनुमति देता है।
नुकसान
प्रोटीन विकृतीकरण, उच्च लागत, और न्यूरोटॉक्सिन रसायनों की उपस्थिति इस तकनीक के नुकसान हैं।	यह तकनीक समय लेने वाली है और एक अच्छा अनुभवी व्यक्तिगत और विशिष्ट नियंत्रित परिस्थितियों की आवश्यकता है

सारांश - एसडीएस पृष्ठ बनाम पश्चिमी ब्लाट

एसडीएस पेज और वेस्टर्न ब्लॉट प्रोटीन विश्लेषण में दो तरीके शामिल हैं। एसडीएस पृष्ठ उनके आणविक भार के अनुसार एक जेल पर प्रोटीन की आसान अलगाव की अनुमति देता है। पश्चिमी ब्लॉट विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ संकरण के माध्यम से विशिष्ट प्रोटीन की मौजूदगी और मात्रा की पुष्टि करने में मदद करता है। यह एसडीएस पेज और वेस्टर्न ब्लॉट के बीच अंतर है।

संदर्भ:

1 ब्लैंशर, सी।, और ए जोन्स "एसडीएस -पेज और पश्चिमी ब्लोटिंग तकनीकें "आणविक चिकित्सा में तरीकों यू.एस. नेशनल लाइब्रेरी ऑफ मेडिसिन, एन घ। वेब। 27 मार्च 2017

2 नोआकोव्स्की, एंड्रयू बी, विलियम जे। वाबिग, और डेविड एच। पीटरिंग "मूल एसडीएस पृष्ठ: बन्धे धातु आयनों सहित मूल गुणों के प्रतिधारण के साथ प्रोटीन का उच्च संकल्प इलेक्ट्रोफ़ोरेटिक पृथक्करण। "मेटालॉमिक्स: एकीकृत बायोमैटिकल साइंस यू.एस. नेशनल लाइब्रेरी ऑफ मेडिसीन, मई 2014. वेब 27 मार्च 2017.

चित्र सौजन्य:

1 "एसडीएस पेज इलैक्ट्रोफोरेसिस" अंग्रेजी विकिपीडिया पर बेन्सकाउंट द्वारा (सीसी द्वारा 3. 0) कॉमन्स विकिमीडिया के माध्यम से

2 "वेस्टर्न ब्लॉट 114 ए" अमानतबागडन द्वारा - कॉमन्स के माध्यम से अपना काम (सार्वजनिक डोमेन) विकिमीडिया