आरटी पीसीआर और क्यूपीसीआर के बीच अंतर; आरटी पीसीआर बनाम क्यूपीसीआर

मुख्य अंतर - आरटी पीसीआर बनाम क्यूपीसीआर

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन एक तकनीक है जो डीएनए के एक विशिष्ट क्षेत्र को बढ़ाता है इन विट्रो में। 1 9 83 में इस मौके पर कारी मुलिंस ने इस तकनीक के आविष्कार के कारण वैज्ञानिक अनुसंधान उद्देश्यों के लिए विशिष्ट डीएनए टुकड़ों की हजारों से अधिक प्रतियां बनाने में सक्षम हैं। वर्तमान में यह आवेदनों की विस्तृत विविधता के लिए नैदानिक ​​और अनुसंधान प्रयोगशालाओं में एक सामान्य और नियमित रूप से प्रयुक्त तकनीक बन गई है। आरटी पीसीआर, नेस्टेड पीसीआर, मल्टीप्लेक्स पीसीआर, क्यू पीसीआर, आरटी - क्यूपीसीआर, आदि जैसे पारंपरिक पीसीआर तकनीक के बदलाव हैं। आरटी पीसीआर और क्यू पीसीआर पीसीआर के दो महत्वपूर्ण बदलाव हैं। आरटी पीसीआर और क्यू पीसीआर के बीच मुख्य अंतर यह है कि आरटी पीसीआर का उपयोग आरएनए से जबकि Q पीसीआर का उपयोग किया जाता है पूरक डीएनए (सीडीएनए) टेप के निर्माण के माध्यम से जीन अभिव्यक्ति का पता लगाने के लिए किया जाता है मात्रात्मक रूप से फ्लोरोसेंट रंजियों का उपयोग करते हुए पीसीआर उत्पादों को वास्तविक समय मापने के लिए

सामग्री

1। अवलोकन और महत्वपूर्ण अंतर

2 आरटी पीसीआर 3 क्या है QPCR

4 क्या है साइड तुलना द्वारा साइड - आरटी पीसीआर बनाम क्यूपीसीआर

5 सारांश

आरटी पीसीआर क्या है?

रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (आरटी पीसीआर) पीसीआर का एक प्रकार है जो कि आरएनए एक्सप्रेशन का पता लगाने में उपयोग किया जाता है। यह ऊतकों में एमआरएनए अभिव्यक्ति का पता लगाने के लिए एक बहुत ही महत्वपूर्ण तरीका है। आरटी पीसीआर का प्रयोग तब किया जाता है जब नमूना की प्रारंभिक सामग्री आरएनए होती है आरटी पीसीआर में, टेम्पलेट एमआरएनए पहले पूरक डीएनए में परिवर्तित हो गया है। यह कदम एंजाइम रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेज़ द्वारा उत्प्रेरित किया गया है और इस प्रक्रिया को रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के रूप में जाना जाता है। दूसरे, पारंपरिक पीसीआर प्रवर्धन के लिए नए संश्लेषित सीडीएनए के लिए उपयोग किया जाता है।

आरटी पीसीआर एक अत्यधिक संवेदनशील तकनीक है जिसके लिए आरएनए नमूने की अपेक्षाकृत छोटी मात्रा की आवश्यकता होती है। आरटी पीसीआर आमतौर पर आरएनए प्रजातियों के निदान और मात्रा का ठहराव में उपयोग किया जाता है, विशेषकर आरएनए वायरस जैसे कि मानव इम्युनोडिफीसिअन्सी वायरस और हेपेटाइटिस सी वायरस

चित्रा 01: आरटी पीसीआर तकनीक

QPCR क्या है?

मात्रात्मक पीसीआर (क्यूपीसीआर) पीसीआर का एक प्रकार है जो कि पीसीआर उत्पादों को मात्रात्मक रूप से मापने के लिए प्रयोग किया जाता है। इसे रीयल-टाइम पोलीमरेज़ चेन रिलेक्शन के रूप में भी जाना जाता है क्योंकि यह वास्तविक समय पीसीआर मशीन का उपयोग करके वास्तविक समय के प्रवर्धन को मापता है। यह एक नमूना में उपस्थित लक्ष्य अनुक्रम या जीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए एक उपयुक्त तरीका है। QPCR की दिलचस्प विशेषता यह है कि यह एक ही चरण में प्रवर्धन और सच्ची मात्रा का ढांचा दोनों को जोड़ती है। इसलिए, जेल वैद्युतकणसंचलन की आवश्यकता को क्यूपीसीआर तकनीक द्वारा समाप्त किया जा सकता है। पीसीपी प्रतिक्रियाओं के दौरान QPCR पीसीआर उत्पादों को लेबल करने के लिए फ्लोरोसेंट रंजक का उपयोग करता है, जो अंततः प्रत्यक्ष मात्रा का ठहराव करता है।जब पीसीआर उत्पादों को जमा किया जाता है, तो फ्लोरोसेंट संकेत भी संचित होते हैं और इसे वास्तविक समय मशीन द्वारा मापा जाएगा। QPCR आरटी पीसीआर के साथ जोड़ा जा सकता है इसे आरटी - क्यूपीसीआर या क्यूआरटी - पीसीआर के रूप में जाना जाता है और इसे कोशिकाओं या ऊतकों में आरएनए स्तरों का पता लगाने के लिए सबसे शक्तिशाली, संवेदनशील और मात्रात्मक विधि माना जाता है।

एसआईबीआर ग्रीन और ताकमान वास्तविक समय पीसीआर की प्रवर्धन प्रक्रिया का पता लगाने या देखने के लिए नियोजित दो तरीके हैं। एसआईबीआर ग्रीन पद्धति को एक फ्लोरोसेंट डाई का उपयोग किया जाता है जिसे सीआईबीआर हरा कहा जाता है और प्रणोदन का पता लगाता है ताकि दोगुने फंसे डीएनए का उत्पादन किया जा सके। Taqman दोहरे लेबल जांच का उपयोग किया जाता है और Taq पोलीमरेज़ द्वारा जांच की गिरावट के द्वारा प्रवर्धन का पता लगाता है और आंकड़ा 02 में दिखाए अनुसार फ्लोरोफोरे के रिलीज। दोनों तरीकों प्रवर्धन प्रक्रिया की प्रगति की निगरानी करते हैं और वास्तविक समय के उत्पाद की मात्रा की रिपोर्ट करते हैं ।

वास्तविक समय पीसीआर में कई तरह के अनुप्रयोग हैं जैसे कि जीन एक्सक्शंस क्वांटिफिकेशन, माइक्रोआरएनए और एनकोडिंग आरएनए विश्लेषण, एसएनपी जीनोटाइपिंग, कॉपी नंबर वेरिएंट्स का पता लगाने, दुर्लभ म्यूटेशन का पता लगाने, आनुवांशिक रूप से संशोधित जीवों का पता लगाने, संक्रामक एजेंटों का पता लगाना आदि ।

चित्रा 2: मात्रात्मक पीसीआर तकनीक

आरटी पीसीआर और क्यूपीसीआर में क्या अंतर है?

- तालिका से पहले अंतर आलेख ->

आरपी पीसीआर बनाम क्यूपीसीआर

आरटी पीसीआर एक तकनीक है जिसे प्रवर्धन द्वारा जीन अभिव्यक्ति का पता लगाने में उपयोग किया जाता है।
QPCR एक तकनीक है जो डीएनए को बढ़ाता है और वास्तविक समय में पीसीआर उत्पादों को मात्रा देता है।	रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेज़ एंजाइम का समावेश
एंजाइम रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेज़ आरटी पीसीआर के लिए प्रयोग किया जाता है
QPCR के लिए एंजाइम रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेज़ का उपयोग नहीं किया गया है	फ्लोरोसेंटली लेबल वाले अणुओं का प्रयोग
आरटी पीसीआर के लिए फ्लोरोसेंटली लेबल वाले डाईज या जांच का उपयोग नहीं किया जाता है
QPCR के लिए फ्लोरोसेंटली लेबल वाले डाईज या जांच का उपयोग किया जाता है	पीसीआर उत्पाद की मात्रा
जब तक क्यूपीसीआर के साथ युग्मित न हो, आरटी पीसीआर पीसीआर उत्पाद की मात्रा निर्धारित नहीं करता है
QPCR मात्रात्मक पीसीआर उत्पाद को मापने	प्रारंभिक सामग्री
प्रारंभिक सामग्री एमआरएनए है
प्रारंभिक सामग्री डीएनए है	सीडीएनए के संश्लेषण पूरक डीएनए आरटी पीसीआर के दौरान तैयार किया जाता है
क्यूपीसीआर के दौरान पूरक डीएनए का उत्पादन नहीं किया गया है।
सारांश - आरटी पीसीआर बनाम क्यूपीसीआर	आरटी पीसीआर और क्यूपीसीआर पारंपरिक पीसीआर के दो संस्करण हैं। आरटी पीसीआर तकनीक एमआरएनए नमूनों के लिए किया जाता है और यह रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और सीडीएनए के उत्पादन से प्रेरित है। QPCR का उपयोग वास्तविक समय पीसीआर तापीय चक्र के दौरान फ्लोरोसेंट डाईज या लेबल जांच के दौरान पीसीआर उत्पादों को मापने के लिए किया जाता है। क्यूपीसीआर में, पीसीआर उत्पाद की मात्रा नमूने द्वारा उत्सर्जित फ्लोरोसेंट सिग्नल द्वारा दर्शायी जाती है। आरटी पीसीआर लोकप्रिय रूप से एक प्रवर्धन प्रक्रिया के रूप में उपयोग किया जाता है जबकि क्यूपीसीआर सामान्यतः मात्रा का ठहराव प्रक्रिया के रूप में उपयोग किया जाता है। यह आरटी पीसीआर और क्यूपीसीआर के बीच अंतर है।

संदर्भ:

1 दीपक, एसए, केआर कोट्टापल्ली, आर। राकवाल, जी। ओरोस, केएस रंगप्पा, एच। इवाहाशी, वाई। मासुओ, और जीके अग्रवाल। "रियल-टाइम पीसीआर: जेनस के क्रांतिकृत खोज और अभिव्यक्ति विश्लेषण "वर्तमान जीनोमिक्सबेन्थम साइंस पब्लिशर्स लिमिटेड, जून 2007. वेब 03 अप्रैल। 2017

2 जैका, फजलल्बा, कैट्रीन वेंडरहेडेन, एल्स डी स्मैट, क्लाउड ए कुवेलियर, पीटर मेस्टागैग, और जो वंदेसोमपेले "एफएफपीई के नमूनों का सरल और संवेदनशील RT-qPCR आधारित जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण। "प्रकृति समाचार प्रकृति प्रकाशन समूह, 22 फरवरी 2016. वेब 03 अप्रैल। 2017

3 ओवरब्रग, एल।, ए। गीलियेट्टी, डी। वाल्क्स, बी। डिसेलोन, आर। बुलोन, और सी। मेथ्यू। "साइटोकीन जीन अभिव्यक्ति की मात्रा के लिए रीयल-टाइम रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेज़ पीसीआर का उपयोग। "बायोमोलेकुलर तकनीकों का जर्नल: जेबीटी बायोमोलेकुलर रिसोर्स सुविधाएं एसोसिएशन, मार्च 2003. वेब 03 अप्रैल। 2017

छवि सौजन्य:

1 "Taqman" उपयोगकर्ता द्वारा: Braindamaged - मूल अपलोडर (सार्वजनिक डोमेन) द्वारा कॉमन्स विकिमीडिया के माध्यम से खुद का काम

2 "रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन" जेपीक 623 द्वारा - कॉमन्स विकिमीडिया के माध्यम से स्वयं का काम (सीसी बाय-एसए 3. 0) विकिमीडिया