पीसीआर और डीएनए अनुक्रमण के बीच का अंतर

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मुख्य अंतर - पीसीआर बनाम डीएनए अनुक्रमण पीसीआर और डीएनए अनुक्रमण दो आणविक जीवविज्ञान में दो महत्वपूर्ण तकनीक हैं

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) एक प्रक्रिया है जो डीएनए टुकड़ा की एक बड़ी संख्या बनाता है। डीएनए अनुक्रमण तकनीक है जो किसी दिए गए डीएनए खंड के न्यूक्लियोटाइड्स के सटीक क्रम में परिणाम देता है यह पीसीआर और डीएनए अनुक्रमण के बीच मुख्य अंतर है। पीसीआर डीएनए अनुक्रमण में शामिल एक प्रमुख कदम है।

सामग्री

1। अवलोकन और महत्वपूर्ण अंतर

2 पीसीआर 3 क्या है डीएनए अनुक्रमण 4 क्या है साइड तुलना द्वारा साइड - पीसीआर बनाम डीएनए अनुक्रमण 5 सारांश> पीसीआर क्या है?

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) एक डीएनए प्रवर्धन तकनीक है जो आणविक जीवविज्ञान में प्रयोग किया जाता है। यह एक विशेष डीएनए टुकड़ा की हजारों की लाखों प्रतियां पैदा करता है। इस पद्धति का निर्माण 1 9 83 में केरी मुल्लिस द्वारा किया गया था। इस तकनीक में, डीएनए के टुकड़े को विस्तारित करने के लिए टेम्पलेट और डीएनए पोलीमरेज़ एंजाइम के रूप में कार्य करता है जो पूरक न्यूक्लियोटाइड को प्राइमर को जोड़ता है जो पीसीआर मिश्रण में उपलब्ध है। पीसीआर प्रतिक्रिया के अंत में, नमूना डीएनए की कई प्रतियां संश्लेषित होती हैं।

पीसीआर मिश्रण के विभिन्न घटकों में डीएनए, डीएनए पोलीमरेज़ (टैक पोलीमरेज़), प्राइमर्स (आगे और रिवर्स प्राइमरों), न्यूक्लियोटाइड (डीएनए के ब्लॉकों का निर्माण) और बफर शामिल हैं। पीसीआर पीसीआर मशीन के अंदर होता है, और सही पीसीआर मिश्रण को मशीन में लोड किया जाना चाहिए, और सही कार्यक्रम संचालित होना चाहिए। यह तकनीक डीएनए की एक बहुत ही छोटी मात्रा में डीएनए के एक विशेष खंड के हजारों की प्रतियां का उत्पादन करने में सक्षम बनाता है।

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पीसीआर प्रतिक्रियाएं एक जेल पर पीसीआर उत्पादों की दृश्यमान मात्रा का उत्पादन करने के लिए एक चक्रीय तरीके से होती हैं। चित्रा 1 में दिखाए गए अनुसार पीसीआर प्रतिक्रिया में विकृतकरण, प्राइमर एनीलिंग और स्ट्रैंड एक्सटेंशन में तीन प्रमुख कदम हैं। ये तीन चरणों तीन अलग-अलग तापमानों पर होने वाली हैं पूरक अड्डों के बीच हाइड्रोजन बांडों द्वारा डीएनए दोहरे फंसे हुए रूप में मौजूद है। निहितार्थ से पहले, डबल फंसे हुए डीएनए को एक दूसरे से अलग किया जाना चाहिए। यह एक उच्च तापमान देकर किया जाता है। एक उच्च तापमान पर, एकल किस्में में डबल असंतुष्ट डीएनए खंडन। इसके बाद प्राइमरों को विशिष्ट टुकड़ा या डीएनए के जीन के छल्ले के करीब आना चाहिए। प्राइमर एकल-फंसे डीएनए का एक छोटा टुकड़ा है जो लक्ष्य अनुक्रम के पूरक है। एनेलिंग तापमान पर विकृत नमूना डीएनए के झुकाव समाप्त होने पर पूरक ठिकानों के साथ प्राइमरों को अग्रसारित करें और रिवर्स करें।प्राइमर गर्मी प्रतिरोधी होना चाहिए नमूना डीएनए के साथ प्राइमरों के एनील एक बार, टैक पोलीमरेज़ एंजाइम ने न्यूक्लियोटाइड जोड़कर नए किस्में के संश्लेषण को शुरू किया जो लक्ष्य डीएनए के पूरक हैं। Taq पोलीमरेज़ एक ताप स्थिर एंजाइम है जिसे थर्मोफिलिक जीवाणु से अलग किया जाता है जिसे

थर्मस एक्वाटिकस

कहते हैं। पीसीआर बफर ताक पोलीमरेज़ एक्शन के लिए इष्टतम स्थितियां रखता है। पीसीआर प्रतिक्रियाओं के इन तीन चरणों को पीसीआर उत्पाद की आवश्यक मात्रा के उत्पादन के लिए दोहराया जाता है। प्रत्येक पीसीआर प्रतिक्रिया के बाद, डीएनए कॉपी की संख्या दोगुनी हो जाती है। इसलिए, पीसीआर में एक घातीय प्रवर्धन देखा जा सकता है। पीसीआर उत्पादों जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग कर मनाया जा सकता है और आगे के अध्ययन के लिए शुद्ध किया जा सकता है।

चित्रा 01: पीसीआर प्रतिक्रिया के प्रमुख कदम

पीसीआर चिकित्सा और जैविक अनुसंधान में एक महत्वपूर्ण उपकरण है। पीसीआर का फॉरेंसिक विज्ञान में एक विशेष मूल्य है क्योंकि यह अपराधियों के छोटे नमूनों के अध्ययन के लिए डीएनए को बढ़ा सकता है और फॉरेंसिक डीएनए प्रोफाइल बना सकता है। पीसीआर का व्यापक रूप से आणविक जीव विज्ञान के कई क्षेत्रों में प्रयोग किया जाता है, जिसमें जीनोटाइपिंग, जीन क्लोनिंग, उत्परिवर्तन का पता लगाने, डीएनए अनुक्रमण, डीएनए माइक्रोएरे और पितृत्व परीक्षण आदि शामिल हैं। चित्रा 02: पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन

डीएनए अनुक्रमण क्या है? डीएनए अनुक्रमण एक विशिष्ट डीएनए टुकड़ा में न्यूक्लियोटाइड - एडिनिन, गैनिन, साइटोसिन और थाइमाइन के सटीक आदेश का निर्धारण है। आनुवंशिक जानकारी डीएनए अनुक्रमों में nucleotides के सही क्रम का उपयोग करते हुए संग्रहीत है। इसलिए, जीन के संरचना और कार्य के बारे में जानने के लिए डीएनए टुकड़ा में न्यूक्लियोटाइड्स का सटीक आदेश बहुत महत्वपूर्ण है। डीएनए अनुक्रमण प्रोटोकॉल में विभिन्न प्रक्रियाएं शामिल हैं पहला कदम जीव के डीएनए या जीनोमिक डीएनए के अलगाव का है। पीसीआर का प्रयोग (जैसा कि ऊपर वर्णित है), डीएनए के वांछित क्षेत्र को बढ़ाना चाहिए। एम्प्लिफाइड पीसीआर उत्पाद जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा अलग और शुद्ध किया जाना चाहिए। अनुक्रमित टुकड़े अनुक्रमण के लिए टेम्पलेट्स के रूप में परोसा जाता है। अनुक्रमण या तो सेंगर अनुक्रमण या उच्च थ्रूपुट अनुक्रमण विधि के अनुसरण में किया जा सकता है। सेंगर अनुक्रमण के परिणामस्वरूप डीएनए टुकड़ों के केशिका वैद्युतकणसंचलन की आवश्यकता होती है। सही न्यूक्लियोटाइड ऑर्डर का निर्धारण ऑटोरेडियोोग्राफ के मैनुअल रीडिंग या स्वचालित डीएनए सिक्वोनर्स द्वारा किया जा सकता है।

जीन अनुक्रमण ने मानव जीनोम परियोजना में योगदान दिया और 2003 में मानव जीनोम के मानचित्रण की सुविधा प्रदान की। फोरेंसिक में, डीएनए अनुक्रमण उन व्यक्तियों की सक्षम पहचान जो कि अद्वितीय डीएनए दृश्य दिखाते हैं और अपराधियों की पहचान करते हैं। चिकित्सा में, आनुवांशिक और अन्य बीमारियों के लिए जिम्मेदार जीन का पता लगाने के लिए डीएनए अनुक्रमण का उपयोग किया जा सकता है, दोष जीन मिल सकता है और उन्हें सही जीन के साथ बदल दिया जा सकता है। कृषि में, कुछ सूक्ष्मजीवों की डीएनए अनुक्रमण जानकारी का प्रयोग आर्थिक रूप से वांछित विशेषताओं के साथ ट्रांसजेनिक फसलों का उत्पादन करने के लिए किया जाता है।

चित्रा 03: डीएनए अनुक्रमण पीसीआर और डीएनए अनुक्रमण के बीच अंतर क्या है?

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पीसीआर बनाम डीएनए अनुक्रमण पीसीआर प्रक्रिया हजारों की दिलचस्पी डीएनए टुकड़ा की प्रतियां बनाता है।

डीएनए अनुक्रमण एक दिया डीएनए टुकड़ा में न्यूक्लियोटाइड्स के सटीक आदेश को निर्धारित करने की प्रक्रिया है।

परिणाम

पीसीआर एक विशेष डीएनए टुकड़ा के हजारों की लाखों प्रतियां बनाता है

यह एक विशेष डीएनए टुकड़ा में कुर्सियां ​​के सही क्रम में होता है।

डीडीएनटीपी के सम्मिलन

पीसीआर को डीडीएनटीपी की ज़रूरत नहीं है यह डीएनटीपी का उपयोग करता है

डीएनए अनुक्रमण को किनारा गठन को समाप्त करने के लिए डीडीएनटीपी की जरूरत है।
सारांश - पीसीआर बनाम डीएनए अनुक्रमण आणविक जीवविज्ञान के कई क्षेत्रों में पीसीआर और डीएनए अनुक्रमण काफी महत्वपूर्ण उपकरण हैं। डीएनए टुकड़े के प्रवर्धन पीसीआर तकनीक द्वारा किया जाता है, जबकि डीएनए टुकड़े के न्यूक्लियोटाइड के सही क्रम को डीएनए अनुक्रमण द्वारा निर्धारित किया जाता है। यह पीसीआर और डीएनए अनुक्रमण के बीच का अंतर है।	संदर्भ:
1 "पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) " बायोटेक्नोलॉजी सूचना के लिए राष्ट्रीय केंद्र। यू.एस. नेशनल लाइब्रेरी ऑफ मेडिसिन, एन घ। वेब। 21 फरवरी 2017.
2 शेंदुर, जे, और हनी जी जी "अगली पीढ़ी के डीएनए अनुक्रमण "प्रकृति समाचार प्रकृति प्रकाशन समूह, 09 अक्टूबर 2008. वेब 21 फरवरी 2017	चित्र सौजन्य:
1 "पीसीआर चरण" Tinojasontran द्वारा - स्वयं के काम (सार्वजनिक डोमेन) कॉमन्स विकिमीडिया
2 "पॉलीमेरेज़ चेन रिएक्शन" एन्जोकलोप द्वारा - स्वयं के काम (सीसी बाय-एसए 3. 0) कॉमन्स विकिमीडिया के माध्यम से	3 "डीएनए अनुक्रम" द्वारा एसजेफ - अपने काम (सार्वजनिक डोमेन) कॉमन्स के माध्यम से विकिमीडिया