दक्षिणी, उत्तरी और पश्चिमी ब्लोटिंग के बीच अंतर दक्षिणी बनाम उत्तरी बनाम पश्चिमी ब्लोटिंग

मुख्य अंतर - उत्तरी बनाम दक्षिणी बनाम पश्चिमी ब्लोटिंग

डीएनए, आरएनए, और प्रोटीन के विशिष्ट अनुक्रमों की जांच विभिन्न के लिए आवश्यक है आणविक जीव विज्ञान में अध्ययन के प्रकार जेल वैद्युतकणसंचलन एक तकनीक है जो डीएनए, आरएनए और प्रोटीन्स को अपने आकारों के अनुसार अलग करती है। जेल प्रोफाइल से, विशेष डीएनए अनुक्रम, आरएनए अनुक्रम, या प्रोटीन, विशेष जांच द्वारा जांच की जाती है, जो लेबल की जांच के साथ ब्लूटिंग और हाइब्रिडिज़ेशन कहते हैं। तीन अलग-अलग प्रकार के विधियों, अर्थात् दक्षिणी, उत्तरी और पश्चिमी हैं उत्तरी दक्षिणी और पश्चिमी ब्लोटिंग के बीच मुख्य अंतर एक नमूने से पता लगाए गए अणु के प्रकार के साथ है। दक्षिणी सूंघना एक विधि है जो डीएनए नमूने से एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाता है। उत्तरी छलनी एक तकनीक है जो आरएनए नमूने से एक विशिष्ट आरएनए अनुक्रम का पता लगाता है। पश्चिमी ब्लोटिंग एक विधि है जो प्रोटीन नमूने से विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाता है।

सामग्री

1। अवलोकन और महत्वपूर्ण अंतर

2 दक्षिणी छंटाई 3 क्या है नॉर्दर्न ब्लोटिंग क्या है

4 पश्चिमी ब्लॉटिंग 5 क्या है साइड तुलना द्वारा साइड - उत्तरी बनाम दक्षिणी बनाम वेस्टर्न ब्लॉटिंग

6 सारांश

दक्षिणी छंटाई क्या है?

डीएनए नमूने से एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम की पहचान के लिए 1975 में ई। एम। दक्षिणी द्वारा दक्षिणी छलनी तकनीक विकसित की गई थी। यह आणविक जीव विज्ञान में शुरू की गई पहली blotting तकनीक है इसने डीएनए से विशिष्ट जीनों का पता लगाने, डीएनए से विशिष्ट टुकड़े आदि को सक्षम किया। दक्षिणी छलनी तकनीक में कई कदम शामिल थे। वे इस प्रकार हैं:

डीएनए नमूना से अलग है और प्रतिबंध endonucleases के साथ पच जाता है

डाइजेस्टेड नमूना Agarose जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा अलग किया गया है।

1. जेल में डीएनए टुकड़े एक क्षारीय समाधान के उपयोग से एकल किस्में में विकृत होते हैं।
2. केशिका हस्तांतरण द्वारा एकल फंसे हुए डीएनए को नाइट्रोसेल्यूलोज फिल्टर झिल्ली में स्थानांतरित किया जाता है।
3. हस्तांतरित डीएनए झिल्ली पर स्थायी रूप से तय हो गई है
4. झिल्ली पर फिक्स्ड डीएनए लेबल जांच के साथ हाइब्रिज्ड किया गया है।
5. धुलाई से झिल्ली से अनबाउंड डीएनए धोया जाता है
6. एक्स-रे फिल्म झिल्ली के संपर्क में है और एक ऑटोरेडियोोग्राफ तैयार है।
8. आणविक जीव विज्ञान के विभिन्न पहलुओं के लिए दक्षिणी सूंघ लगाने का प्रयोग किया जाता है।यह आरएफएलपी मानचित्रण, फोरेंसिक अध्ययन, जीन की अभिव्यक्ति में डीएनए मेथिलैशन, आनुवंशिक विकारों में डीएनए फिंगरप्रिंटिंग आदि में उत्परिवर्तित जीन का पता लगाने में उपयोगी है। चित्रा 1: दक्षिणी छेड़छाड़ तकनीक

उत्तरी वर्गीकरण क्या है?

उत्तरी छलनी जीन अभिव्यक्ति का अध्ययन करने के लिए एक नमूना से एक विशिष्ट आरएनए अनुक्रम या एमआरएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए डिज़ाइन की गई विधि है। यह तकनीक 1 9 7 9 में एल्विन, केम्प, और स्टार्क द्वारा विकसित की गई थी। यह कई चरणों के कारण सोरथरन और पश्चिमी ब्लोटिंग तकनीकों से अलग है। हालांकि, इस तकनीक को जेल वैद्युतकणसंचलन, ब्लोटिंग और विशिष्ट लेबल जांच और पहचान के साथ संकरण के माध्यम से किया जाता है। उत्तरी वर्गीकृत तकनीक निम्न प्रकार से किया जाता है

आरएनए नमूना से निकाला जाता है और जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा अलग किया जाता है।

आरएनए जेल से एक ब्लोटिंग झिल्ली पर और फिक्स्ड पर स्थानांतरित किया जाता है।

झिल्ली सीडीएनए या आरएनए (जांच नमूने में एक विशिष्ट क्रम के पूरक है) से तैयार लेबल जांच के साथ इलाज किया जाता है।

1. जांच एक विशिष्ट क्रम के साथ बाँध करने के लिए झिल्ली के साथ incubated है
2. अनबाउंड जांच को धोया जाता है
3. हाइब्रिज्ड किए गए टुकड़े एक ऑटोरेडियोोग्राफ द्वारा पता लगाए जाते हैं।
4. उत्तरी मुंहतोड़ हाइब्रिज्ड एमआरएनए का पता लगाने और मात्रा का ठहराव, आरएनए में गिरावट का अध्ययन, आरएनए आधा जीवन का मूल्यांकन, आरएनए splicing का पता लगाने, जीन की अभिव्यक्ति का अध्ययन करने आदि का एक महत्वपूर्ण उपकरण है।
5. चित्रा 02: उत्तरी छलनी
6. पश्चिमी ब्लॉटिंग क्या है?

पश्चिमी ब्लोटिंग लेबल एंटीबॉडी के प्रयोग से एक प्रोटीन मिश्रण से विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने की एक विधि है। इसलिए, पश्चिमी धब्बा को भी

इम्यूनोबलॉट के रूप में जाना जाता है। यह तकनीक 1 9 7 9 में टोवबिन

एट अल द्वारा पेश की गई थी और यह अब नियमित रूप से प्रोटीन विश्लेषण के लिए प्रयोगशालाओं में किया जाता है। निम्न प्रकार हैं:

प्रोटीन नमूना से निकाला जाता है प्रोटीन पॉलीएक्लामामाइड जेल वैद्युतकणों का उपयोग करके अपने आकारों से अलग हो जाते हैं अलग-अलग अणुओं को पीवीडीएफ झिल्ली या इलेक्ट्रोप्रोरेज द्वारा नाइट्रो सेल्यूलस झिल्ली में स्थानांतरित कर दिया जाता है झिल्ली को अवरोधन के लिए अवरुद्ध किया गया है एंटीबॉडी ट्रांसफर प्रोटीन प्राथमिक एंटीबॉडी (एंजाइम लेबल एंटीबॉडीज) के साथ बाध्य हैं

1. झिल्ली को स्पष्ट रूप से बाध्य प्राथमिक एंटीबॉडी को हटाने के लिए धोया जाता है
2. बाध्य एंटीबॉडीज को एक सब्सट्रेट जोड़कर पता लगाया जाता है और बनाई गई रंग का द्रव्य का पता लगाता है
3. पश्चिमी ब्लोटिंग मानव सीरम नमूने में एंटी-एचआईवी एंटीबॉडी का पता लगाने में उपयोगी है । पश्चिमी ब्लॉट को हेपेटाइटिस बी संक्रमण के लिए एक पुष्टि परीक्षण और पागल गाय रोग के लिए निश्चित परीक्षण के रूप में भी इस्तेमाल किया जा सकता है।
4. चित्रा 03: पश्चिमी ब्लोटिंग
5. उत्तरी दक्षिणी और पश्चिमी ब्लोटिंग के बीच अंतर क्या है?
6. - तालिका से पहले अंतर अनुच्छेद ->
7. उत्तर बनाम दक्षिणी बनाम पश्चिमी ब्लॉटिंग

अणु का प्रकार का पता लगाया गया

उत्तरी छंटाई

उत्तरी छलनी आरएनए नमूने से एक विशिष्ट आरएनए अनुक्रम का पता लगाता है

दक्षिणी छंटाई

दक्षिणी सूंघने डीएनए नमूने से एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाता है।
पश्चिमी ब्लोटिंग
पश्चिमी ब्लॉटिंग प्रोटीन नमूने से विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाता है	जेल का प्रकार
नॉर्दर्न ब्लोटिंग	यह एगारोस / फॉर्मलाडिहाइड जेल का उपयोग करता है।
दक्षिणी छंटाई	यह एक एगारोज जेल का उपयोग करता है
पश्चिमी ब्लोटिंग
यह पॉलिएक्लामाइड जेल का उपयोग करता है	विध्वंस विधि
उत्तरी छलनी	यह एक केशिका हस्तांतरण है
दक्षिणी छंटाई	यह एक केशिका हस्तांतरण है
पश्चिमी ब्लोटिंग
यह एक विद्युत अंतरण है	प्रयुक्त किए गए प्रयोगों
नॉर्दर्न ब्लोटिंग	सीडीएनए या आरएनए जांचों को रेडियोधर्मी या गैर-सीधा रूप से लेबल किया गया
दक्षिणी छंटाई डीएनए जांचों को रेडियोधर्मी या गैर-रेडियोधर्मी रूप से चिह्नित किया जाता है	पश्चिमी ब्लोटिंग
प्राथमिक एंटीबॉडी जांच के रूप में उपयोग किया जाता है
डिटेक्शन सिस्टम	नॉर्दर्न ब्लोटिंग
यह एक ऑटोरेडियोोग्राफ का उपयोग किया जाता है, या प्रकाश या रंग बदलने का पता लगाया जाता है	दक्षिणी छंटाई
यह एक ऑटोरेडियोोग्राफ, प्रकाश या रंग परिवर्तन का पता लगाने के द्वारा किया जाता है	पश्चिमी ब्लोटिंग
यह प्रकाश या रंग परिवर्तन का पता लगाने के द्वारा किया जाता है
सारांश - उत्तरी बनाम दक्षिणी बनाम पश्चिमी ब्लाटिंग	नमूनाकरण से विशिष्ट डीएनए, आरएनए या प्रोटीन की पहचान के लिए विकसित एक विशेष तकनीक है। एक विशिष्ट प्रकार के अणु का पता लगाने के लिए तीन अलग-अलग ब्लोटिंग प्रक्रियाएं, अर्थात् उत्तरी, दक्षिणी और पश्चिमी, हैं। उत्तरी छलनी तकनीक आरएनए के मिश्रण से एक विशिष्ट आरएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए बनाया गया है। दक्षिणी निस्तारण तकनीक डीएनए नमूने से एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने में सक्षम बनाता है और पश्चिमी ब्लोटिंग तकनीक को प्रोटीन मिश्रण से विशिष्ट प्रोटीन की पहचान करने के लिए विकसित किया गया है।
संदर्भ	1। गिबन्स, जानले "पश्चिमी ब्लॉट: प्रोटीन ट्रांसफर अवलोकन "मेडिकल साइंसेज के उत्तरी अमेरिकी जर्नल मेडकनो पब्लिकेशंस एंड मीडिया प्राइवेट लिमिटेड, मार्च 2014. वेब 27 मार्च 2017
2 ब्राउन, टी। "दक्षिणी सूंघने वाला "इम्यूनोलॉजी में वर्तमान प्रोटोकॉल यू.एस. नेशनल लाइब्रेरी ऑफ मेडिसिन, मई 2001. वेब 27 मार्च 2017	3 वह, शान एल "उत्तरी धब्बा "एंजाइमोलॉजी में तरीके यू.एस. नेशनल लाइब्रेरी ऑफ मेडिसिन, 2013. वेब 27 मार्च 2017

चित्र सौजन्य:

1 आरएनए 405 द्वारा "नॉर्दर्न ब्लोट स्कीम" - कॉमन्स विकिमीडिया के जरिए अपना काम (सार्वजनिक डोमेन)

2 "वेस्टर्न ब्लॉट 114 ए" अमानतबागडन द्वारा - कॉमन्स के माध्यम से अपना काम (सार्वजनिक डोमेन) विकिमीडिया